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紅細(xì)胞裂解液的原理說明與使用方法

更新時(shí)間:2024-10-12      點(diǎn)擊次數(shù):219

紅細(xì)胞裂解液是一種去除紅細(xì)胞簡便易行的方法,即用裂解液裂解紅細(xì)胞,它既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除方法,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化,淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。

原理說明

利用細(xì)胞內(nèi)外的離子濃度差異,形成滲透壓差,外部的水分會(huì)擴(kuò)散至細(xì)胞內(nèi),使紅細(xì)胞膨脹,達(dá)到裂解的效果。

紅細(xì)胞裂解液效.jpg

使用方法

1.裂解紅細(xì)胞

(1) 向 1 份待裂解的新鮮全血中加入 3 倍體積的紅細(xì)胞裂解液(如 1mL 新鮮全血加入 3mL 紅細(xì)胞裂解液)輕輕渦旋或顛倒混勻。【注】:如果對新鮮組織細(xì)胞進(jìn)行處理需經(jīng)胰酶等消化成單個(gè)細(xì)胞懸液后離心收集細(xì)胞后再進(jìn)行后續(xù)操作。

(2) 冰上孵育 15 min,其間輕輕渦旋混勻 2 次。【注】:紅細(xì)胞裂解后,溶液應(yīng)該是清亮透明的。

2.收集白細(xì)胞

(1)在 4℃,450×g 離心 10 min 收集白細(xì)胞,小心吸棄上清液。

(2) 向以上沉淀中加入兩倍體積的紅細(xì)胞裂解液,輕輕渦旋充分重懸白細(xì)胞(例如起始血液為 1 mL,則加入 2 mL 的紅細(xì)胞裂解液)。

(3) 在 4℃,450×g 離心 10 min 收集白細(xì)胞,小心并吸去上清液。

(4) 重懸細(xì)胞,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。【注】:如提取 RNA,最好從此步開始使用無 RNase 的溶液進(jìn)行。

紅細(xì)胞裂解液產(chǎn)品

[名稱] 李記生物

[名稱] 紅細(xì)胞裂解液

[貨號(hào)] AP01L106

[規(guī)格]  100mL


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